期刊简介

本刊为适应我国计划生育事业发展的需要,受国家计划生育委员会的委托,由北京协和医院与国家计划生育委员会科学技术研究所联合主办, 并经国家科委批准,国内外公开发行的国家级学术性刊物。读者对象主要是以从事生殖医学领域科技人员及医务工作者。本刊宗旨,主要为男、女性生殖医学临床、生殖生理、生育调节及生殖 疾病的防治开辟学术论坛,介绍研究成果,推广新技术,促进国内外学术交 流和生殖医学领域的学科发展。本刊设有论著、评论、综述、临床经验、技术 交流、研究简讯、讲座、会议消息等栏目。

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  • 杂志名称:生殖医学杂志
  • 主管单位:生殖医学
  • 主办单位:国家人口和计划生育委员会
  • 国际刊号:11-4645/R
  • 国内刊号:11-4645/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1996全国计划生育科技期刊质量评比获优秀期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美)
生殖医学杂志2016年第10期

以壳聚糖纳米微球为载体的Crisp1-DNA避孕疫苗的制备及体外表达

罗金;杨菁;程琰;张怡;徐望明

关键词:Crisp-1, 避孕, DNA疫苗, 壳聚糖, 纳米微球
摘要:目的 构建以壳聚糖纳米微球为载体的Crisp1 DNA疫苗,对其物理学、生物学活性进行测定,并评估其在COS-7细胞中的表达情况及细胞毒性. 方法 采用本实验室前期构建的真核表达质粒pcDNA3.1-Crisp1,以复凝法制备载Crisp1 DNA疫苗的壳聚糖纳米粒(CS/DNA NPs),用透射电镜以及凝胶阻滞分析对其相关物理学、生物学活性进行测定,然后将载Crisp1 DNA疫苗的壳聚糖纳米粒转染至COS-7细胞,检测其细胞毒性,并用间接免疫荧光法鉴定其在细胞内的表达情况. 结果 透射电镜结果显示纳米粒形态较均一,平均粒径为189.3 nm,Zeta电位约为+0.2 mV.凝胶阻滞分析显示壳聚糖微粒可将DNA疫苗完全阻滞于加样孑孔中并保护DNA质粒不降解.MTT试验显示壳聚糖组细胞存活率显著高于脂质体组(P<0.01).间接免疫荧光实验结果显示CS/DNA NPs能在COS-7细胞中有效表达Crisp 1抗原蛋白. 结论 由壳聚糖纳米微球介导的Crisp1 DNA疫苗,可在真核细胞中有效地表达,且具有较小的细胞毒性,为进一步发展安全有效的DNA避孕疫苗打下了基础.